PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測儀是指通過(guò)熒光染料或熒光標記的特異性探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標記跟蹤，實(shí)時(shí)監測反應過(guò)程的儀器。結合相應的軟件可以對產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析，計算待測樣品模板的初始濃度。在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程。

　　PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測儀的操作規程：

　　1、開(kāi)機：

　　a、依次打開(kāi)電腦顯示器和電腦主機的電源開(kāi)關(guān)，進(jìn)入Windows界面；

　　b、接著(zhù)打開(kāi)AB7500儀器電源開(kāi)關(guān)，預熱10分鐘；

　　c、點(diǎn)擊SDS軟件。

 

　　2、檢測：

　　a、選擇File-New-新建，在New Document Wizard窗口中，從Assay下拉列表中選擇反應類(lèi)型：相對定量，定量，等位基因鑒別或陽(yáng)性陰性實(shí)驗，從Container下拉列表中選擇反應板類(lèi)型，在Default Plate Name中輸入反應板文件名，點(diǎn)擊Next，選擇需要添加到反應板文件的探針，點(diǎn)擊Next，為每個(gè)孔探針和任務(wù)，單擊Finish。

　　b、在Well Inspector-View-Well Inspector中輸入樣品名。

　　c、運行相應的反應類(lèi)型程序，選擇Instrument設定PCR條件。

　　d、點(diǎn)擊Save下拉菜單下的Save As，輸入文件名，點(diǎn)擊save，關(guān)閉設置界面。

　　e、按壓儀器托盤(pán)上的按壓位，待托盤(pán)彈出后，將所需檢測反應板放入檢測孔位，再次按壓托盤(pán)使其滑入儀器，點(diǎn)擊Start開(kāi)始檢測。

 

　　3、結果分析：PCR反應結束后自動(dòng)保存結果，對擴增曲線(xiàn)進(jìn)行分析，選擇Analysis-Analysis Settings 選擇Auto Ct，軟件自動(dòng)為每個(gè)反應空生成基線(xiàn)和閾值，也可根據分析后圖像調節Baseline的Start值、End值，Threshold值，點(diǎn)擊Analyze進(jìn)行再次分析。

　　4、關(guān)機：實(shí)驗結束后取出反應管，順序關(guān)閉AB7500軟件、定量PCR儀電源，關(guān)閉電腦。